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中国团队利用Type II-C型NmeCas9蛋白开发植物基因编辑新工具

日期:2021-11-09 17:51 作者: 来源:农业农村部科技教育司
 
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   9月28日,《植物生物技术》期刊在线发表相关研究成果。安徽农业大学/安徽省农业科学院魏鹏程团队和河南大学陆平利团队合作基于type II-C型NmCas9蛋白(Nm1Cas9和Nm2Cas9),创建了植物靶向突变及单碱基编辑新工具。

  虽然自然界CRISPR-Cas9系统有很大一部分是type II-C型,但是植物基因工程多利用II-A和II-B亚家族的编辑系统。近年来,II-C亚型中的NmCas9由于具有蛋白小、活力高、PAM序列差异大和脱靶率低等特点被广泛应用于基因组编辑理论研究和动物细胞基因工程操作,但在植物中的应用未见报道。
  研究人员首先构建了植物表达NmCas9s靶向系统,并通过sgRNA骨架选择、gRNA长度筛选、Cas9关键位置定点突变等手段开展了系列优化,在水稻中实现了以N4GATT和N4CC为PAM的靶向突变,并开发了相应的-eBE3,-HyBE3,-eA3A,-eCDA,-ABE及-ABE8e等系列植物单碱基编辑工具。该研究丰富了植物基因编辑系统类型。(来源:《植物生物技术》期刊)