中华人民共和国农业农村部公告 第110号

根据《兽药管理条例》和《兽药注册办法》规定，经审查，批准德国勃林格殷格翰动物保健有限公司生产的美洛昔康注射液在我国再注册，核发《进口兽药注册证书》,并发布修订后的产品质量标准、说明书和标签、最高残留限量（试行）以及残留检测方法标准（试行），自发布之日起执行。此前发布的该产品兽药质量标准、说明书和标签同时废止。

批准勃林格殷格翰动物保健有限公司意大利生产厂生产的鸡痘活疫苗等2种兽药产品变更注册。

特此公告。

附件：1.进口兽药注册目录

          2.质量标准

3.说明书和标签

4.美洛昔康每日允许摄入量和最高残留限量（试行）

5.美洛昔康残留检测方法标准（试行）

农业农村部

2018年12月19日

附件1

进口兽药注册目录

附件2（略）

附件3

一、美洛昔康注射液说明书

美洛昔康注射液说明书

兽用

【兽药名称】

通用名称：美洛昔康注射液

商品名称：美达佳®

英文名称：Meloxicam Injection

汉语拼音：Meiluoxikang Zhusheye

【主要成分】 美洛昔康

【性状】 本品为黄色澄明液体。

【药理作用】 非甾体类抗炎药。美洛昔康通过抑制前列腺素的合成发挥作用，主要功能为抗炎、镇痛和解热。美洛昔康可抑制白细胞向发炎组织的趋化作用，轻度抑制胶原蛋白诱导的血小板聚集。另外，在犊牛、泌乳牛和猪使用美洛昔康时，显示美洛昔康具有抗内毒素作用，可抑制大肠杆菌内毒素诱导生成血栓素B2。

【适应证】 牛：与适宜的抗生素合用，辅助治疗急性呼吸道感染以缓解牛的临床症状；与内服补液合用，辅助治疗腹泻以缓解超过一周龄的小牛与青年非泌乳牛的临床症状；与适宜的抗生素合用，辅助治疗急性乳房炎。

猪：用于非感染性运动异常以减轻跛行与炎症；与适宜的抗生素合用，辅助治疗产后败血症与毒血症（乳房炎-子宫炎-无乳综合症）。

【用法与用量】 以美洛昔康计。牛皮下或静脉注射：与适宜的抗生素或内服补液合用，一次量，每1kg体重，牛0.5mg，仅用一次。

猪肌内注射：与适宜的抗生素合用，一次量，每1kg体重，猪0.4mg。若需要，24小时之后，再注射一次。

【不良反应】 1.皮下注射后，注射部位偶见轻微的一过性肿胀。

    2.有极少数动物出现过敏反应，应对症治疗。

【注意事项】 1.禁用于肝功能、心功能或肾功能损伤、出血异常，或胃肠道溃疡的动物。

2.禁用于对本品过敏的动物。

3.禁用于治疗一周龄以内的牛的腹泻。

4.具有潜在肾毒性，慎用于严重脱水、血容量减少或低血压等需要注射补液的动物。

5.禁与糖皮质激素、其他非甾体类抗炎药或抗凝血药合用。

6.对NSAIDs过敏的人应该避免接触本品。

7.远离儿童。

【休药期】 牛15日，猪5日；弃奶期5日。

【规格】 （1）20ml：400mg （2）50ml：1g （3）100ml：2g （4）250ml：5g

【包装】

【贮藏】 密闭保存。

【有效期】 36个月；开启后28日。

【进口兽药注册证号】

【生产企业】 Labiana 生命科学制药厂（Labiana Life Sciences S.A.）

地址：Venus 26, Can Parellada Industrial, 08228 Terrassa, Barcelona, Spain

    二、美洛昔康注射液标签

美洛昔康注射液标签

兽用

【兽药名称】

通用名称：美洛昔康注射液

商品名称：美达佳®

英文名称：Meloxicam Injection

汉语拼音：Meiluoxikang Zhusheye

【主要成分】 美洛昔康

【适应证】 牛：与适宜的抗生素合用，辅助治疗急性呼吸道感染以缓解牛的临床症状；与内服补液合用，辅助治疗腹泻以缓解超过一周龄的小牛与青年非泌乳牛的临床症状；与适宜的抗生素合用，辅助治疗急性乳房炎。

猪：用于非感染性运动异常以减轻跛行与炎症；与适宜的抗生素合用，辅助治疗产后败血症与毒血症（乳房炎-子宫炎-无乳综合症）。

【用法与用量】 以美洛昔康计。牛皮下或静脉注射：与适宜的抗生素或内服补液合用，一次量，每1kg体重，牛0.5mg，仅用一次。

猪肌内注射：与适宜的抗生素合用，一次量，每1kg体重，猪0.4mg。若需要，24小时之后，再注射一次。

【休药期】 牛15日，猪5日；弃奶期5日。

【规格】 （1）20ml：400mg （2）50ml：1g （3）100ml：2g （4）250ml：5g

【包装】

【生产日期】

【生产批号】

【有效期】至

【贮藏】 密闭保存。

【进口兽药注册证号】

【生产企业】 Labiana 生命科学制药厂（Labiana Life Sciences S.A.）

地址：Venus 26, Can Parellada Industrial, 08228 Terrassa, Barcelona, Spain

附件4

美洛昔康每日允许摄入量和最高残留限量（试行）

    申报单位参照欧盟有关标准制定了美洛昔康的每日允许摄入量（ADI）和美洛昔康在猪及牛组织中的最高残留限量（MRLs），如下表：

附件5

美洛昔康残留检测方法标准（试行）

动物性组织中美洛昔康残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

1 范围

本标准规定了动物性组织中美洛昔康残留检测的制样和液相色谱-串联质谱法测定方法。

本标准适用于猪和牛的肌肉、肝脏、肾脏及牛奶中美洛昔康残留量的检测。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修定版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682  分析实验室用水规格和试验方法

3 原理

试料中残留的美洛昔康，经蛋白酶酶解后，用磷酸二氢钠缓冲液与二氯甲烷提取（牛奶样品不需酶解直接提取），固相萃取柱净化，正己烷液-液萃取除脂，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。

4 试剂和材料

以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂；水为符合GB/T 6682规定的一级水。

4.1 美洛昔康对照品（C14H13N3O4S2），纯度大于99.9%。

4.2 美洛昔康-D3对照品（C14H10D3N3O4S2），纯度大于99.9%。

4.3 超纯水  由Milli-Q超纯水仪制取。

4.4 柠檬酸

4.5 磷酸二氢钠

4.6 二氯甲烷  色谱纯。

4.7 无水硫酸钠

4.8 乙腈  色谱纯。

4.9 甲醇  色谱纯。

4.10 正己烷  色谱纯。

4.11 蛋白酶：Type VIII，来源于地衣芽孢杆菌。

4.12 固相萃取柱：正相硅胶柱，500mg/3mL，或效能相当者。

4.13 滤膜  滤膜孔径为0.2µm。

4.14 美洛昔康贮备液（1mg/mL）：准确称取美洛昔康对照品10mg，置10mL容量瓶中，用0.2mol/LNaOH溶液1.5mL溶解，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为1mg/mL贮备液。-20℃贮藏，有效期6个月。

4.15 美洛昔康-D3内标贮备液（100µg/mL）：准确称取美洛昔康-D3对照品1mg，置10mL容量瓶中，用0.2mol/LNaOH溶液1.5mL溶解，用甲醇稀释至刻度，配成浓度为100µg/mL贮备液。-20℃贮藏，有效期6个月。

4.16 美洛昔康标准工作液（100µg/mL）：精密量取1mL美洛昔康贮备液于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。-20℃贮藏，有效期6个月。

4.17 美洛昔康-D3内标工作液（1µg/mL）：精密量取0.1mL美洛昔康-D3内标贮备液于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。-20℃贮藏，有效期6个月。

5 仪器和设备

5.1 超高效液相色谱-串联质谱仪  配电喷雾离子源。

5.2 分析天平  感量0.00001g。

5.3 天平  感量0.01g。

5.4 组织匀浆机

5.5 水浴摇床

5.6 高速冷冻离心机

5.7 涡旋混合器

5.8 氮吹仪

6 试样的制备与保存

6.1 试料的制备

取适量新鲜或解冻的空白或供试组织，绞碎，并使均质。

——取均质的供试样品，作为供试试料

——取均质的空白样品，作为空白试料。

——取均质的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。

6.2 试料的保存

-20°C以下保存。

7 测定步骤

7.1 提取

7.1.1组织

准确称取组织1g，精密加入1µg/mL内标工作液10µL，涡旋1min，静置15min，加0.75mg/mL蛋白酶溶液（现用现配）4mL，涡动1min，50℃水浴摇床过夜。冷至室温，加2.25mol/L柠檬酸溶液1.5mL，涡旋1min混匀，加入0.15mol/L磷酸二氢钠溶液10mL，二氯甲烷15mL振摇30s，4000rpm离心5min，将下层的二氯甲烷层用吸管取至另一离心管中，水相加二氯甲烷10mL重复提取一次，合并二氯甲烷层备用。

7.1.2 牛奶

精密量称取牛奶2g，精密加入1µg/mL内标工作液20µL，涡旋1min，静置15min，加0.2mol/LHCl溶液200µL，乙腈2mL，涡旋2min，4000rpm离心5min，取上清液，加0.15mol/L磷酸二氢钠溶液10mL，0.2mol/LNaCl溶液2mL，二氯甲烷15mL振摇30s，4000rpm离心5min，将下层的二氯甲烷层用吸管取至另一离心管中，水相加二氯甲烷10mL重复提取一次，合并二氯甲烷层备用。

7.2 净化

预先在针筒内垫滤纸，加无水硫酸钠5g，连接到固相萃取柱上，用二氯甲烷5mL活化，备用液全部上柱，再用二氯甲烷5mL洗试管后上柱。用20%乙腈的二氯甲烷溶液5mL洗脱。40℃水浴氮气吹干，用甲醇1mL复溶，涡旋1min，超声2min，加水1mL混匀。加入甲醇饱和的正己烷溶液4mL，涡旋1min，10000rpm离心10min，弃正己烷层，14000rpm离心20min，取上清液滤过，供超高效液相色谱-串联质谱测定。

7.3 基质匹配标准曲线的制备

空白样品按7.1和7.2项下方法进行处理后，在空白试料经提取净化后的残余物中加入适量的美洛昔康标准工作液和美洛昔康-D3内标工作液制备基质匹配标准溶液，对应组织样品添加浓度分别为3、5、10、50、100、150和200μg/kg，对应牛奶样品添加浓度分别为1、5、10、50、100、150和200μg/kg，供超高效液相色谱-串联质谱测定。以测得的美洛昔康特征离子峰面积与美洛昔康-D3特征离子峰面积之比作为纵坐标，对应的浓度为横坐标，绘制标准曲线。求线性回归方程和相关系数。

7.4 测定

7.4.1 色谱条件

色谱柱：C18，2.1mm×50mm，1.7μm或效能相当者。

流动相：A相为0.1%甲酸溶液；B相为0.1%甲酸的乙腈溶液。

流速：0.4 mL/min。

柱温：40℃。

进样量：5µL。

梯度洗脱：梯度洗脱程序见表1。

表1  梯度洗脱条件

7.4.2 质谱条件

离子源：电喷雾离子源。

扫描方式：正离子扫描。

检测方式：多反应监测。

电离电压：2.5kV。

源温：150℃。

雾化温度：500℃。

锥孔气流速：150L/h。

雾化气流速：800L/h。

药物定性、定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量见表2。

表2  药物定性、定量离子及锥孔电压、碰撞能量的参考值

    （a定量离子）

    7.5 测定法

7.5.1 定性测定

通过样品色谱图的保留时间与对照品的保留时间、各色谱峰的特征离子与相应浓度标准溶液色谱峰的特征离子相对照定性。样品与对照品保留时间的相对偏差不大于2.5%；样品特征离子的相对丰度偏差不超过表3的规定，则可判断样品中存在相应的被测物。

表3  定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差

7.5.2 定量测定

取试样溶液和相应的基质匹配标准工作液，按内标法定量，标准工作液及试样溶液中美洛昔康的响应值均应在仪器检测的线性范围内。

7.6 空白试验

除不加试料外，采用完全相同的步骤进行平行操作。

8 结果计算和表述

 

式中：

X——试料中美洛昔康的残留量，μg/kg；

C——从标准曲线得到的美洛昔康浓度，μg/L；

A_i——试料溶液中美洛昔康的峰面积；

A’_is——基质匹配标准溶液中美洛昔康内标的峰面积；

C_s——基质匹配标准溶液中美洛昔康的浓度，μg/L；

C_is——试料溶液中美洛昔康内标的浓度，μg/L；

A_is——试料溶液中美洛昔康内标的峰面积；

A_s——基质匹配标准溶液中美洛昔康的峰面积；

C’_is——基质匹配标准溶液中美洛昔康内标的浓度，μg/L；

V——最终定容体积，mL；

m——称样量，g；

f——稀释倍数。

注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。

9 检测方法灵敏度、准确度和精密度

9.1 灵敏度

本方法在猪、牛组织（肌肉、肝脏、肾脏）中美洛昔康的检测限均为3µg/kg，定量限均为4µg/kg；在牛奶中美洛昔康的检测限为1µg/kg，定量限为2µg/kg。

9.2 准确度

本方法在2～130µg/kg添加浓度水平上的回收率为70%～110%。

9.3 精密度

本方法的批内相对标准偏差≤20%，批间相对标准偏差≤20%。